隨著疫情的常態(tài)化，大家越來越熟悉新冠核酸檢測。新冠核酸快速檢測是新冠病毒檢測“金標(biāo)準(zhǔn)”，可是對于檢驗人來說，這個金標(biāo)準(zhǔn)可不簡單，眾所周知PCR檢測技術(shù)本來就屬于高技術(shù)檢測。再加上新冠核酸檢測的特殊性，對標(biāo)本的檢測帶來巨大困難，隨之而來的就是各種假陽性、假陰性的結(jié)果。那么如何解決這些問題就成為檢驗人的一個難題。其實如果我們對PCR檢測了解多一些，其實這些問題是可以避免的。
試劑質(zhì)量：試劑比對、性能驗證、批間差等
檢測試劑：靈敏度
提取試劑：提取效率
標(biāo)本因素
標(biāo)本類型：肺泡灌洗液、痰液、鼻拭子、咽拭子、肛拭子等。
標(biāo)本采集：采樣不規(guī)范、部位不當(dāng)、采集標(biāo)本中被感染的細(xì)胞太少或沒有。
標(biāo)本保存、運輸與處理：室溫放置不超過4小時，應(yīng)在2-4小時內(nèi)送到實驗室。長途運輸應(yīng)采用干冰等制冷方式保存。24小時未檢測的樣本應(yīng)置于-70℃保存，新冠病毒RNA病毒靶基因降解對于RNA樣品影響更加嚴(yán)重。
1、要保證試劑的質(zhì)量，必須建立試劑驗證嚴(yán)格的SOP文件，每一批次的試劑比對、性能驗證必須認(rèn)真完成并形成書面報告已備溯源。
2、重癥以及危重癥患者應(yīng)該首選肺泡灌洗液以及痰液。普通篩查最好選用鼻拭子。
3、操作人員一定選用技術(shù)能力合格，身體健康，心理素質(zhì)較好的工作人員。
4、核酸提取應(yīng)該嚴(yán)格執(zhí)行sop，符合試劑說明書要求，Sop建立必須科學(xué)具有操作性。
5、科學(xué)規(guī)范采樣。
6、規(guī)范送檢，合理時間檢測可以有效預(yù)防假陰性。
7、PCR抑制物是造成假陰性的重要原因，所以實驗室盡量不存放與實驗無關(guān)物品，安全柜應(yīng)該無多余物品。吸頭選用去RNA酶的產(chǎn)品。
1、如果2份假陽性樣本均在陽性質(zhì)控管附近，可以推測是加樣操作不當(dāng)引起。2、某一批檢測結(jié)果出現(xiàn)多個陽性結(jié)果，而且復(fù)檢仍為陽性，但是在其它機構(gòu)檢測為陰性。這種結(jié)果多為樣本中有一個強陽性，因為操作人員操作不當(dāng)導(dǎo)致后續(xù)樣本全為陽性，因為是原始樣本污染，所以復(fù)檢也為陽性。3、實驗人員在常規(guī)篩查中發(fā)現(xiàn)單靶標(biāo)陽性，工作環(huán)境檢測也能檢測到，該情況多為擴增產(chǎn)物污染，該情況出現(xiàn)多為工作人員無分區(qū)概念，擴增區(qū)沒有嚴(yán)格進(jìn)行消毒造成高濃度擴增產(chǎn)物被帶入到提取實驗區(qū)，引起的假陽性。（上述情況均可以通過分區(qū)操作、嚴(yán)格實驗室清潔消毒、加強操作人員的操作規(guī)范性避免。）4、嚴(yán)格執(zhí)行三份陰性樣本隨機放在臨床樣本中參與整個提取擴增過程的質(zhì)控策略。5、擴增八連管的蓋子一定要蓋嚴(yán)以防泄露。
引起假陽性和假陰性的原因有很多，作為檢驗人應(yīng)該嚴(yán)格執(zhí)行SOP，提高實驗人員的檢驗技能，把每個環(huán)節(jié)都落實到實處，真正做到“做你所寫，寫你所做”，那么我們的檢驗報告將非常科學(xué)公正。同時在全面抗擊疫情中展現(xiàn)出檢驗工作人員科學(xué)、專業(yè)、敬業(yè)的精神面貌
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